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变性温度是否准确PR仪指示温度与实际温度是否相符,过高酶在前几个循环就迅速失活;过低则模板变性不。 反应系统中污染了蛋白酶及核酸酶,应在未加Tq酶以前,将反应体系95℃加热5-10分钟。 引物变质失效。人工合成的引物是否正确。是否纯化,或因储存条件不当而失活。

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